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          HPLC用的乙腈與甲醇的區別

          來源:www.ssxdd.com發布時間:2018-10-16

            1、吸光度

            乙腈HPLC級的小。乙腈和甲醇的市銷HPLC級和優級的吸收光譜中,乙腈HPLC吸收最小(特別是在短波長上小)。所謂HPLC級是除去具有吸收UV的雜質,在規定的波長上吸光度限制在規格值以內。在UV檢測時,產生的噪聲小,因此在進行UV短波長上的高靈敏度分析時乙腈HPLC級最適宜。另外,在UV檢測中的梯度基線上也是乙腈HPLC級產生鬼峰少,雖然,其他與水相溶性高的有機溶劑有各種各樣,但很難能找到比乙腈HPLC級吸收更小的。另外,甲醇的HPLC級和優級,雖然所得的光譜相差不大,但是優級不能保證吸光度,有可能產生偏差,價格也相差不大,所以盡量使用HPLC級。

            2、壓力

            乙腈低,柱內承受的壓力,根據有機溶劑的種類或混合比率的不同而異,水/乙腈,水/甲醇混合液的比率與輸液壓力的關系中,甲醇與水混合,壓力增高,而乙腈同樣與水混合且并不如此。所以,乙腈一方,在同樣的流速下不在柱內加上多余的壓力。從上述兩項,可以確認使用乙腈的意義,那么,甲醇除了價格以外,還有沒有其化優點呢?

            3、洗脫能力

            一般而言,乙腈較強。乙腈和甲醇分別用同樣的比率與水混合時,一般情況下,乙腈的洗脫能力強。特別是混合比率低時,從咖啡因和苯酚的洗脫來看,獲得同樣的保留時間,乙腈的比率,只需甲醇的比率的一半以下即可。另一方面,有機溶劑100%或與此極接近時,從胡蘿卜素和膽甾醇來看,常常都是甲醇的洗脫能力強。混合比在50比1等較為特殊時,調制的誤差大,影響保留時間,或平衡化的時間長,乙腈遇到這種情況時,用甲醇的10比1混合代替乙腈,這樣操作方便些。溶劑受溫度影響時,不采用容器定量,而采用重量的方法(考慮比重),可使混合比的誤差減小。

            4、分離(洗脫)的選擇性

            兩者的差異,乙腈和甲醇在分離的選擇性上不同。由于有機溶劑分子的化學性質(甲醇和乙醇是質子性,乙腈和四氫呋喃是非質子性)不同所致。因此,在用乙腈類不能獲得分離的選擇性,就試用甲醇類看看。

            5、峰形

            用時出現差異。像水楊酸化合物(在鄰位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物)等,用乙腈類時拖尾大,用甲醇類可抑制。可是,一般情況下,聚合物類反相柱,與硅膠柱相比,更具有峰形寬的傾向,特別是用聚苯乙烯分析柱芳香族化合物等時常見。這在流動相是甲醇時非常顯著,而用乙腈時不明顯。為此,用聚合物類反相用柱時建議采用后者(乙腈類),這是因為乙腈使凝膠膨潤。

            6、流動相的脫氣,乙腈類要注意

            混合溶劑的置制,不說在LC裝置內,只談預先在流動相瓶內進行時,(等濃度系統)。甲醇與水混合時發熱,多余的溶解空氣較易變為脫出氣泡(脫氣容易)。而乙腈由于吸熱冷卻,隨著慢慢回到室溫,產生氣泡,所以要考慮脫氣(加溫攪拌,過濾膜,He脫氣等)。

            7、結論

            以上反相色譜法流動相常用的乙腈和甲醇進行了比較。粗略地講是,使用乙腈HPLC級最好,在選擇性,峰形差時試用甲醇HPLC,但根據各種不同性質設計分析條件也是必要。

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